Menghitung Derajat Deasetilasi

Derajat deasetilasi kitin dan kitosan optimum dengan menggunakan spektrofotometer IR. Spektrum diperoleh dari sampel tang berupa padatan. Disiapkan serbuk kitin dan kitosan optimum yang kemudian dicampurkan dengan KBr kering. Campuran tersebut di tumbuk hingga diperoleh ukuran partikel yang kecil. Sampel yang telah dihaluskan kemudian dimasukkan kedalam pellet press secara merata. Kemudian pellet press dihubungkan ke pompa hidrolik dengan kekuatan 100 ton (kg newton) serta dipompa vakum selama 15 menit. Diusahakan pellet dibuka secara hati-hati, kemudian pellet yang dihasilkan dipindahkan dengan menggunakan spatula ke dalam sel holder. Serapan sampel selanjutnya diukur dengan FTIR. Data serapan yang dihasilkan digunakan untuk menganalisis gugus fungsi yang muncul serta untuk menghitung derajat deasetilasi. Derajat deasetilasi dapat dihitung dengan metode baseline yang diusulkan Baxter 1992 dalam Purwatiningsih 2009 yang memadukan metode penentuan garis dasar pada pita serapan A1655/A2867 dan A1655/A3450. Puncak (Peak) tertinggi dicatat dan diukur dari garis dasar yang dipilih dan nilai absorbansi dihitung  dengan menggunakan rumus :

 A= log Po/P

Dimana :Po adalah % transmitan pada garis dasar

            : P adalah % transmitan pada puncak minimum

            Perbedaan antara absorbansi pada frekuensi 1655 cm^-1, serapan pita amida  I dengan absorbansi pada frekuensi 3450 cm^-1 (serapan gugus hidroksil) dapat dihitung. Untuk %N-deasetilasi kitosan yang sempurna (100%) diperoleh nilai A₁₆₅₅ = 1,33, pengukuran nilai absorbansi pada puncak yang terkait dengan derajat N-deasetilasi dapat dihitung dengan cara yang dikemukakan oleh Baxter :

DD = 1 - (A1655/A3450 x 1/1,33) 100%

Keterangan      :A₁₆₅₅ : nilai absorbansi pada 1655 cm^-1

                        :A₃₄₅₀ : nilai absorbansi pada 3450 cm^-1

^{Berikut merupakan contoh perhitungannya.}

 ^{Peak dibawah ini merupakan output FTIR dengan konsentrasi NaOH 60% untuk mendeasetilasi gugus asetil.}

 Tahap pertama yang dilakukan adalah mem-plot peak pada panjang gelombang 1655 dan 3450, Cara plot peaknya dapat dilihat pada gambar diatas. Kemudian mengkonfersinya kedalam Adsorbansi dengan rumus, A = log Po/P, kemudian menyubtitusi hasil kedalam rumus untuk menghitung Derajat deasetilasi.

Semoga Bisa Bermanfaat.